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Sep 25, 2023

Avaliação das respostas imunes humoral e celular induzidas por um coquetel de antígenos recombinantes do vírus da peste suína africana fusionados com OprI em suínos domésticos

Jornal de Virologia

Virology Journal volume 20, Número do artigo: 104 (2023) Citar este artigo

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A peste suína africana (PSA) é uma doença altamente fatal em suínos domésticos causada pelo vírus da PSA (PSA), para o qual atualmente não há vacina comercial disponível. O genoma do ASFV codifica mais de 150 proteínas, algumas das quais foram incluídas em vacinas de subunidades, mas induzem apenas proteção limitada contra o desafio do ASFV.

Para aumentar as respostas imunes induzidas por proteínas ASFV, expressamos e purificamos três proteínas de fusão com cada uma consistindo em lipoproteína bacteriana OprI, 2 proteínas/epítopos ASFV diferentes e um epítopo de célula T CD4+ universal, ou seja, p54-TT modificado por OprI-p30, OprI- pE248R-TT truncado com epítopos de p72 e pEP153R-TT truncado com CD2v truncado com Opr. A atividade imunoestimulante dessas proteínas recombinantes foi avaliada pela primeira vez em células dendríticas. Em seguida, a imunidade humoral e celular induzida por esses três coquetéis de proteínas fundidas com OprI formuladas com adjuvante ISA206 (formulação O-Ags-T) foi avaliada em porcos.

As proteínas fundidas com OprI ativaram células dendríticas com secreção elevada de citocinas pró-inflamatórias. Além disso, a formulação de O-Ags-T provocou um alto nível de respostas de IgG específicas de antígeno e células T CD4+ e CD8+ secretoras de interferon-γ após estimulação in vitro. É importante ressaltar que os soros e as células mononucleares do sangue periférico de porcos vacinados com a formulação O-Ags-T reduziram, respectivamente, a infecção por ASFV in vitro em 82,8% e 92,6%.

Nossos resultados sugerem que o coquetel de proteínas fundidas com OprI formulado com adjuvante ISA206 induz respostas imunológicas celulares e humorais específicas para ASFV em porcos. Nosso estudo fornece informações valiosas para o desenvolvimento de vacinas de subunidade contra a PSA.

A Peste Suína Africana (PSA) é uma doença viral suína hemorrágica altamente contagiosa e devastadora que causa graves perdas econômicas em todo o mundo, para a qual não existe vacina eficaz [1]. O agente causador da PSA, o vírus ASF (ASFV), é um grande vírus de DNA envelopado pertencente ao gênero Asfivirus dentro da família Asfarviridae [2]. O genoma ASFV varia em comprimento entre aproximadamente 170 e 193 kbp e codifica mais de 150 quadros de leitura aberta [3]. Dependendo da sequência do gene B646L (que codifica a proteína do capsídeo p72), o ASFV é atualmente classificado em 24 genótipos diferentes [4]. A PSA foi relatada pela primeira vez no Quênia e tem sido endêmica na África subsaariana por muitos anos [5]. Em 2007, foi introduzido na Geórgia e desde então se espalhou para muitos países da Europa Oriental [6]. Em 2018, a PSA surgiu na China e se espalhou rapidamente para muitas regiões do país e outros países asiáticos [7]. Milhões de porcos foram mortos pela PSA ou abatidos na tentativa de controlar a doença. Atualmente, a PSA ainda é prevalente na China e continua a ser uma séria ameaça para a indústria de suínos [8]. Portanto, uma vacina segura e eficaz contra a PSA é urgentemente necessária.

Várias abordagens têm sido avaliadas para o desenvolvimento de vacinas contra a PSA [9]. No entanto, todas as tentativas de desenvolver vacinas seguras e eficazes contra a PSA não tiveram sucesso [9]. Vacinas contendo vírus inativados não conferiram proteção até agora [10]. Foi demonstrado que cepas de ASFV atenuadas ou de baixa virulência provocam respostas imunes protetoras contra cepas virulentas de ASFV em suínos [11,12,13,14], mas os porcos vacinados geralmente apresentam efeitos colaterais adversos, como viremia crônica [15]. Além disso, a aplicação de ASFV vivo atenuado levanta sérias preocupações de segurança. Em contraste, apesar da indução de proteção apenas parcial contra o desafio de ASFV, as vacinas de subunidades de ASFV oferecem uma opção mais segura [16]. Uma combinação de p30 e p54 recombinantes, ou uma proteína quimérica p54/30, protegeu os animais de doença grave após desafio com ASFV [17, 18]. A imunização de porcos com CD2v recombinante induziu a produção de anticorpos protetores e protegeu 2/3 dos animais contra o desafio de ASFV [19]. Mais recentemente, pEP153R demonstrou ser importante para proteção contra infecção homóloga por ASFV [20]. Curiosamente, os porcos imunizados com uma combinação de p30, p72, p54 e p22 recombinantes produziram anticorpos neutralizantes, mas exibiram apenas um atraso no início da doença após o desafio [21]. Evidências crescentes mostram que as respostas imunes celulares também desempenham um papel fundamental na defesa contra a infecção por ASFV [22, 23]. A imunização com uma biblioteca de expressão de DNA de ASFV protegeu 60% dos porcos contra o desafio de ASFV devido a células T CD8+ específicas de antígeno [22], revelando a existência de potenciais antígenos protetores. Juntas, as abordagens atuais de vacinas de subunidades sugerem a importância de selecionar antígenos ASFV adequados e aumentar a imunidade protetora humoral e celular.